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游離脂肪酸測試盒說明書
[注]：此實(shí)驗(yàn)必須用玻璃試管，不能用半自動及全自動分光光度計(jì)比色）
一、實(shí)驗(yàn)儀器：
玻璃試管、微量移液器、旋渦混勻器、玻璃注射器、硬膜外麻醉針套、玻璃移液管、洗 耳球、低速離心機(jī)、37℃水浴箱（氣浴箱）、可見分光光度計(jì)（440nm）
二、適用范圍：本試劑盒可測各種動物血清、血漿、組織等樣本中 NEFA 的含量。
三、測定意義：
游離脂肪酸，別名非酯化脂肪酸，是脂肪水解產(chǎn)物，測定血清脂肪酸可以了解脂肪代謝的 情況，升高代表脂肪分解增加。
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四、操作步驟：
| 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管 |
雙蒸水（ml） | 0.2 | 0.2 |
|
1000µmol/L 棕櫚酸（ml） |
| 0.2 |
|
待測樣本（ml） |
|
| 0.2 |
試劑二緩沖液（ml） | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
試劑三銅試劑（ml） | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
試劑一（ml） | 4.0 | 3.8 | 4.0 |
充分混勻抽提 2 分鐘，3500 轉(zhuǎn)/分離心 10 分鐘，仔細(xì)吸去上層藍(lán)色液體及蛋白凝
塊棄之，吸取下層抽提液 2ml 進(jìn)行顯色。詳．細(xì)．操．作．見．注．。
下層抽提液（ml） | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
顯色劑（ml） | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
混勻，室溫放置 2 分鐘，在 440nm，1cm 光徑，試劑一調(diào)零比色。
五、計(jì)算
略
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