革蘭氏染色液使用注意事項

革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生 Christain Gram 于 1884 年所發(fā)明，是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，亦是一種復(fù)染法，未經(jīng)染色的細(xì)菌，由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察，染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征，用以分類鑒定，通過此法染色可將細(xì)菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。細(xì)菌的不同顯色反應(yīng)是由于細(xì)胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異，主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的，經(jīng)結(jié)晶紫染色的細(xì)胞用碘液處理后形成不溶性復(fù)合物，乙醇能使它脫色，在革蘭陰性細(xì)胞染色中乙醇或丙酮破壞了胞壁外膜、損傷肽聚糖層和細(xì)胞質(zhì)膜，結(jié)晶紫和碘復(fù)合物從細(xì)胞中滲漏出來，當(dāng)再用其他染色液復(fù)染時，顯現(xiàn)紅色；紅色染料雖然也能進入已染成紫色的 G+細(xì)胞，但被紫色蓋沒，所以紅色顯示不出來；在革蘭陽性細(xì)胞染色中，乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水，導(dǎo)致孔隙變小，由于結(jié)晶紫和碘復(fù)合物分子太大，不能通過細(xì)胞壁，不易脫色，所以保持著紫色。

Standard Gramˊs Stain 采用經(jīng)典的革蘭染色配方, 臨床標(biāo)本直接涂片，背景干凈，胞核胞質(zhì)對比強烈，胞內(nèi)吞噬體清晰易辨認(rèn)，細(xì)菌染色特征典型。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

注意事項：

1、本產(chǎn)品經(jīng)過濾處理，如有少量沉淀或不溶物，可靜置后取上清或過濾后使用。

2、涂片之前，應(yīng)事先在背面做好圓圈標(biāo)記，以便判斷后續(xù)試驗的位置。

3、取細(xì)菌時，應(yīng)注意自我防護，拔或塞試管塞時，應(yīng)將試管口通過火焰略加燒灼，最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。

4、加熱固定涂片時，應(yīng)注意玻片勿太靠近火焰，一般要求玻片溫度不超過60℃，以玻片背面觸及手背皮膚不覺過燙為宜。

5、革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握脫色程度，脫色時間應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗判斷。脫色過度，陽性菌可被誤染為陰性菌；脫色不夠，陰性菌可被誤染為陽性菌。

6、待檢細(xì)菌培養(yǎng)時間會影響染色，陽性菌培養(yǎng)時間過長或已死亡或細(xì)菌溶解，常呈陰性。

7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。